Multirückstandsmethode zur Bestimmung von Nitroimidazolen, Kokzidiostatika und ausgewählten Pestiziden in Muskulatur mittels LC-MSMS – vereinfachte Aufarbeitung, robuste Bestimmung und empfindliche Messung

Hütteroth A., Winkler T., Witt G.
Multirückstandsmethode zur Bestimmung von Nitroimidazolen, Kokzidiostatika und ausgewählten Pestiziden in Muskulatur mittels LC-MSMS – vereinfachte Aufarbeitung, robuste Bestimmung und empfindliche Messung
Posterbeitrag im Rahmen des 5. LGL-Kongresses – Lebensmittelsicherheit und Tiergesundheit,
30.09. – 02.10.2024

Abstract:

Um das Spektrum der Untersuchung auf Tierarzneimittelrückstände zu erweitern und die Aufarbeitung von Proben nach Artikel 34 der VO 2017/625 für den Nationalen Rückstandskontrollplan zu erleichtern wurde eine Methode überarbeitet und verbessert, die am Landeslabor Berlin-Brandenburg (LLBB) bis dahin nur für Kokzidiostatika angewandt wurde. In einem Aufarbeitungsverfahren werden neben den Kokzidiostatika weitere Wirkstoffgruppen (Nitroimidazole, ausgewählte Pestizide, Virginiamycin) erfasst, die für die Untersuchung von Muskulatur relevant sind. Eine vergleichbare Methode wurde im Rahmen der Arbeitsgruppe § 64 LFGB „Tierarzneimittelrückstände“ für Ei validiert [1]. Die hier vorgestellte Methode für Muskulatur verwendet für die Extraktion Acetonitril unter Zugabe von Natriumsulfat und verzichtet auf die Festphasenextraktion. Stattdessen wird der Extrakt ausgefroren und nach der Trennung vom Bodensatz in zwei Extrakte geteilt, eingeengt und mit zwei verschiedenen Aufnahmegemischen gelöst. Durch die Weiterführung von zwei Wirkstoffextrakten wird eine weitere Aufreinigung erzielt und es werden optimale Messbedingungen für die Kokzidiosatika und extra für die Nitroimidazole geschaffen. Die Messung erfolgt mittels Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie im dynamischen MRM-Modus und wird getrennt für die verschiedenen Analytgruppen durchgeführt (zwei Messungen á 15 Minuten).

Für die Validierungsstudie gemäß DVO (EU) 2021/808 wurde Fisch und Fleisch als Matrix eingesetzt, wobei unterschiedliche Spezies (Zander, Forelle, Lachs, Garnele, Huhn, Pute, Schwarzwild und Rind) berücksichtigt wurden. Es wurden 49 verschiedene Wirkstoffe aus den Gruppen der Kokzidiostatika (Ionophore und chemische Kokzidistatika), Nitroimidazole (überwiegend für die Anwendung von lebensmittelliefernden Tieren verboten) und einzelne Pestizide (Einsatz gegen Kokzidien) in das Parameterspektrum aufgenommen.

Die Leistungskriterien der DVO (EU) 2021/808 werden für alle 49 Wirkstoffe der vorgelegten Methode erfüllt, sodass die Methode zur Bestätigungsanalytik im Rahmen der Untersuchung von Muskulaturproben nach Artikel 34 der VO 2017/625 eingesetzt werden kann.

Literatur:
[1] Ferial Dendougui-Tadjine*, Rüdiger Pröhl, Beatrice Piesker and Joachim Polzer; RAFA: 9th International Symposium on Recent Advances in Food Analysis; "Validation of a multi-residue ultra-high-performance liquid chromatography - tandem mass spectrometry confirmatory method for the determination of 42 coccidiostats in egg; 05 - 09 November 2019